1. Alkaline peptone water (APW) [1%] 4.

Eau peptonée alcaline (APW) [1 %] 4.

2. Alkaline Peptone Water (APW) Basal Medium Peptone Sodium chloride (NaCl) Distilled water pH 8.5 ± 0.2 Complete Medium:

Répartir 10 mL dans des éprouvettes et stériliser 10 minutes à 121°C.

3. MacConkey Agar Basal Medium Peptone Lactose Bile salts no.

MacConkey Agar [Gélose MacConkey] Milieu de base Peptone Lactose 20,0 g 10,0 g

4. Preparation for Analysis 7.2.1 Have ready sterile nutrient broth, buffered peptone water or skim milk medium.

Préparatifs pour l'analyse 7.2.1 Avoir à sa disposition du bouillon nutritif, de l'eau peptonée tamponnée ou du milieu au lait écrémé stérile.

5. 7.3 Preparation of Sample 7.3.1 Have ready 0.1% peptone water diluent, and tempered VRBG agar (7.4.2).

7.3 Préparation des échantillons 7.3.1 Avoir à portée de la main du diluant à l'eau peptonée à 0,1 % et de la gélose VRBG tiède (7.4.2).

6. 6.7 A non-selective agar; either Blood agar (BA), Nutrient agar (NA), or Trypticase Soy agar (TSA) 6.8 TSA slants 6.9 Peptone Water diluent 6.10 Staphylococcus broth NOTE :

6.10 Bouillon Staphylocoques NOTE: Utiliser le bouillon Staphylocoques lors d'investigation sur des épisodes d'intoxications alimentaires et/ou lorsque l'échantillon est très petit.

7. 6.3 Preparation of Sample 6.3.1 To ensure a representative analytical unit, agitate liquids until the contents are homogenous. 6.3.2 Collect environmental samples using a 3MTM Quick Swab or equivalent, sponge or other moistened collection device. 6.3.3 Aseptically add 2mL (swab) or 5mL (sponge) sterile 20-30°C Buffered Peptone Water (repair broth) to the collected sample.

6.3 Préparation de l'échantillon 6.3.1 Afin d'assurer une unité d'analyse représentative, mélanger les liquides jusqu'à ce que le contenu soit homogène. 6.3.2 Prélever des échantillons environnementaux à l'aide d'un écouvillon rapide 3MMC ou l'équivalent, d'une éponge ou d'un autre dispositif de prélèvement humide. 6.3.3 Ajouter de manière aseptique à l'échantillon prélevé 2 ml (écouvillon) ou 5 ml (éponge) d'eau peptonée tamponnée stérile (bouillon de reconstitution) à une température de 20 à 30°C (68 à 86°F).

8. The present invention relates to a solid nutrient media composition having alkaline pH, useful for isolating and identifying alkaliphilic microorganisms in pure form, wherein the media composition consisting of 5-15g of carbon source, 2.5-1Og of peptone, 2.5-1Og of yeast extract, 0.5-1.5g of dipotassium hydrogen phosphate; 0.1-0.5g of magnesium sulphate heptahydrate, 30μl-4ml of super saturated solution of sodium hydroxide, 5-2Og of potassium chloride and 10- 3Og of κ-carrageenan in one litre of distilled water.

La composition du milieu consiste en 5 à 15 g d'une source de carbone, 2,5 à 10 g de peptone, 2,5 à 10 g d'extrait de levure, 0,5 à 1,5 g de phosphate hydrogéné dipotassique, 0,1 à 0,5 g de sulfate de magnésium heptahydraté, 30 μl à 4 ml de solution d'hydroxyde de sodium super saturée, 5 à 20 g de chlorure de potassium et 10 à 30 g de κ-carraghénane dans un litre d'eau distillée.

9. 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) Peptone (0.1%) Water diluent (PW) 2% aqueous sodium citrate (tempered to 450C) (for cheese samples only) Nutrient Agar (NA) Tryptic Soy Agar (TSA) Levine's Eosin Methylene Blue (L-EMB) agar or Endo agar Brilliant Green Lactose 2% Bile (BGLB) broth Lauryl Sulfate Tryptose (LST) broth Violet Red Bile (VRBA) Agar Double Strength Violet Red Bile Agar Stomacher, blender or equivalent pH meter or paper capable of distinguishing to 0.3 to 0.5 pH units within a range of 5.0 to 8.0. 1N HCl and 1N NaOH Gram stain reagents Light microscope Positive and negative control cultures, ATCC or equivalent (see Table II) Incubator capable of maintaining 35EC

1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) 12) 13) 14) 15) 16) Diluant à l'eau peptonée (0,1 %) Solution de citrate de sodium à 2 % (tempérée à 45°C) (pour les échantillons de fromage seulement) Gélose nutritive (NA) Gélose trypticase soja (TSA) Gélose à l'éosine et au bleu de méthylène de Levine (L-EMB) ou gélose Endo Bouillon lactosé au vert brillant et aux sels biliaires 2 % (BGLB) Bouillon tryptosé au lauryl-sulfate (LST) Gélose au rouge violet et aux sels biliaires (VRBA) Gélose au rouge violet et aux sels biliaires, double concentration Mélangeur, stomacher ou l'équivalent. pH mètre ou papier pH capable de distinguer de 0,3 à 0,5 unité pH dans l’échelle de pH 5,0 à 8,0 HCL 1N et NaOH 1N Réactifs pour coloration de Gram Microscope optique Cultures pour témoin positif et négatif, ATCC ou l’équivalent (voir le tableau II) Incubateur capable de maintenir une température de 35EC.