1. 如果Tm太高,即高于80°C,也会导致问题,因为DNA聚合酶在此温度下活性较低。

Nhiệt độ biến tính quá cao, ví dụ như trên 80 °C sẽ gây ra nhiều vấn đề vì DNA-polymerase hoạt động kém ở nhiệt độ đó.